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生物咖啡茶

    忠心感谢各位朋友及业界同仁,在整理以下内容时给予的帮助和支持。希望整理的内容能在生物医药产业发展中有正面积极的助推作用。由于个人知识水平有限,难免有疏误之处,希望业界朋友批评指正。也欢迎各位朋友转发分享给自己的朋友,同学,同事,我们一起努力,一起学习。谢谢!

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郑鹏涛
W/Q:514099167
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概论
      层析技术是生物大分子制备工艺的核心技术之一。工欲善其事,必先利其器,在我们设计及实施生物大分子纯化策略及方案时,深入的认知层析技术,了解不同层析技术的差异及应用过程,熟知不同层析技术的选择策略,合理运用各种层析技术为工艺过程服务,了解层析过程中影响因素,驾驭层析技术,做好工艺开发及制备。
认知层析技术
最科学的层析技术分为四类:
1)离子交换层析:离子交换层析应用最为广泛,目标物质和带相反电荷的介质以静电力的作用结合,然后在用高离子或改变pH的方式进行洗脱。特别要注意,蛋白的pI表征的是蛋白表面的净电荷,然而离子交换层析时是蛋白的局部电荷和介质作用,另外离子交换介质吸附的一类物质,如阳离子交换介质吸附带正电荷的物质,所以在纯化过程中,需要配合层析过程进来合理的结合及洗脱过程,才能达到预期的结果。


离子交换层析:
a.离子交换层析在蛋白纯化中的应用
b.全面解析离子交换填料
c.精彩视频|离子交换层析在蛋白纯化中的应用
d.【收藏干货】离子交换层析常见问题解析
e.离子交换填料应用指南
f.离子交换填料沉积色素去除策略
g.复合型离子交换层析介质应用指南

2)凝胶过滤层析:也称为体积排阻层析,分子筛层析,依据不同分子大小的物质在层析介质的孔内,间隙之间分布差异进行分离。凝胶过滤层析通常需要装填比较高的柱床,且装填后的柱效对其分离过程影响很大,而且上样量对其分离效果影响也很大。


凝胶过滤层析:
a.凝胶过滤层析应用策略

b.生物工艺脱盐方案

3)疏水层析:疏水层析和反相层析分离物质的依据是一致的,利用疏水介质的疏水性配基与流动相中的一些疏水分子发生可逆性结合而进行分离。该方法基于的是蛋白质的疏水差异,在高盐溶液中,蛋白质会与疏水配基相结合,而其他的杂蛋白则没有此种性质,利用此种性质,可以将蛋白质初步的分离,用于盐析之后的蛋白质进一步提纯。


疏水层析:
a.疏水层析在蛋白纯化中的应用

4)亲和层析:亲和层析是亲和介质和物质特异性的可逆结合去实现分离的过程,亲和的种类比较多,不同亲和介质其作用原理和洗脱方式差异较大。亲和层析特异性高,纯化时通常有很高的纯度,但相比其它层析载量要低,成本要高很多。

亲和层析:
【1】his标签蛋白纯化
a.【干货】His融合蛋白纯化总结
b.HIS标签蛋白全攻略
c.His标签蛋白镍柱纯化后总有一条杂带怎么办?
d.his融合包涵体蛋白的柱上纯化及复性策略
e.His标签蛋白纯化指南

【2】GST标签蛋白纯化
a.GST融合蛋白纯化解决方案
b.GST融合蛋白纯化纯化攻略
c.GST标签蛋白不结合GST亲和填料怎么办?
d.GST-pull down在蛋白质工程研究中的应用

【3】丝氨酸蛋白酶纯化
a.丝氨酸蛋白酶纯化方案

【4】抗体纯化
a.单克隆抗体精品课程
b.抗体纯化亲和介质选择指南
c.FITC标记抗体的方法,你知道多少?
d.抗体/抗原/多肽键合固定化策略
e.抗体工艺技术(上游技术-下游技术-分析检测技术)一文打尽!
层析介质的认知
层析介质是层析技术的核心,全面认知层析介质,驾驭层析介质为我们纯化所用。
点击下面蓝色标题查看详细内容
1)详述层析柱柱效测定方法
2)层析介质的品质影响因素——基质材料
3)层析介质的品质评价——孔径分布
4)层析介质的品质评价——粒径分布
5)层析介质的品质评价——选择性&分辨率
6)层析介质的品质评价——耐压&流速
7)层析介质的品质评价——配基密度&载量
8)层析介质的品质评价——寿命验证
9)介质的维护及再生,清洗,消毒的差异
10)层析介质的清洗验证
11)层析介质的品质评价——价格&价值&性价比
层析介质选择指南
层析介质是层析技术的关键,选择合适的层析介质是层析工艺过程目标实验的首要任务。
点击下面蓝色标题查看详细内容:
1)基于QbD理念的高通量层析工艺开发一
2)基于QbD理念的高通量层析工艺开发二——应用实例
3)生物分离填料选择指南
4)高流速琼脂糖离子交换介质选择指南
5)超高载量琼脂糖基质离子交换介质应用指南
6)高刚性琼脂糖基质离子交换介质选用指南
7)His标签蛋白纯化指南
8)抗体纯化亲和介质选择指南
9)生物大分子分离纯化指南(一)
10)生物大分子纯化指南(二)
11)疏水层析介质选则南
12)凝胶过滤层析应用策略
层析过程
层析技术只是纯化的一种方法,方法的使用决定其能达到的效果,一个良好的层析过程涉及到很多因素,包容层析介质的选择,层析工艺的设计,层析过程。下面简单介绍层析过程。
1.平衡:使层析柱处于可使用的状态,用于维护良好的结合条件并定义色谱曲线的基线零点。
2.上样:目标分子与介质能够充分,均匀有限接触,实现结合的过程。上样量,上样流速等对分离过程都有很大影响,需要实验摸索最佳上样过程。
3.洗杂:将介质表面,孔内,间隙残留的未和介质结合的物质洗掉。
4.洗脱:将结合在介质上(包括孔内和表面)的物质逐步洗脱下来,洗脱过程又可分多步进行,把结合强弱不同的物质分开,实现分离的目的。
5.维护:维护包括再生,清洗,消毒,保存。介质认知里面有详细介绍。
层析工艺策略
层析技术是生物大分子纯化的关键技术之一,衔接上下游工艺,整合工艺过程,实现最优工艺过程始终是我们追求的目标下面是纯化策略汇总。
点击蓝色标题可查看:
1)his融合包涵体蛋白的柱上纯化及复性策略
2)抗体/抗原/多肽键合固定化策略
3)高效疫苗下游工艺技术策略
4)病毒疫苗纯化策略
5)离子交换填料沉积色素去除策略
6)生物制品下游工艺技术策略——蚯蚓激酶的高效分离纯化工艺策略
7)重组蛋白制备工艺过程中内素素去除策略
8)重组蛋白制备工艺优化策略
9)生物工艺中内毒素去除策略
10)高效VLP分离纯化工艺策略
11)高纯度,高活性IgG制备工艺策略
12)重组生物药工艺过程优化策略
13)重组蛋白纯化策略
14)凝胶过滤层析应用策略
层析工艺过程方案攻略
层析技术是生物大分子纯化的关键技术之一,衔接上下游工艺,整合工艺过程,实现最优工艺过程始终是我们追求的目标下面是纯化攻略汇总。
点击蓝色标题可查看:
1)病毒纯化全攻略
2)天然蛋白纯化攻略
3)包涵体蛋白纯化及复性全攻略
4)GST融合蛋白纯化纯化攻略
5)疫苗纯化手册
6)单克隆抗体精品课程
7)【干货】His融合蛋白纯化总结
8)His标签蛋白镍柱纯化后总有一条杂带怎么办?
9)GST标签蛋白不结合GST亲和填料怎么办?

发表于 2018-10-26 10:58:05 | 显示全部楼层 |阅读模式

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则非要强制十一运夺金我们改成搜索商品标题,然后就陷入了幸运飞艇无穷的循环中为啥正经八百的淘客幸运时时彩都喜欢直链跳转?因为可以规避被流量劫持的风险!

发表于 2020-8-11 16:21:13 | 显示全部楼层

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